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這一研究有多家單位參加,尤其是其中有一些學者來自日本理化研究所,這個研究所是類似中國科學院的研究機構,有非常高的學術影響力。

 

日本理化研究所對氫氣效應的研究也說明日本學術界的重視程度,我們將分幾個部分對這個文章進行介紹,今天主要介紹其研究方法部分,尤其是研究設計,這對許多希望瞭解人體試驗的讀者有一定價值。

 

為什麼要開展這樣的研究?一般的邏輯是,從道理上講,飲用氫水可能有這樣的作用,如果有這樣的作用,可以指導大家採用這樣的手段,正好過去沒有進行過這樣的研究,所以值得研究。

 

慢性氧化壓力和慢性炎症反應可導致中樞神經系統的功能退化,導致降低生活質量(生活質量(Quality of LifeQOL)又被稱為生存質量或生命質量。)。追求健康和充滿活力的生活是許多人的美好願望。如何判斷一種方法對改善人的生活質量促進健康的效果也是十分重要的。大腦是能量代謝最活躍的器官,氧化壓力也能促進大腦內活性氧的大量產生,氧化壓力和脂質過氧化可啓動氧化鏈式反應,導致炎症和氧化損傷,氧化、炎症和蛋白質聚集能促進神經元的死亡,對大腦的認知等功能產生危害。

 

氫氣具有選擇性抗氧化作用,能緩解氧化損傷和炎症損傷。氫氣由於具有巨大的擴散能力,可以非常容易進入大腦組織,可以對中樞神經系統產生多種保護作用。臨床研究發現,飲用氫水能降低代謝綜合徵患者氧化壓力標誌物濃度、改善2型糖尿病患者脂質和糖代謝異常、改善線粒體肌病線粒體功能、減少多發性肌炎/皮肌炎患者炎症反應。在另一項研究中,氫水對劇烈運動導致的肌肉功能障礙也具有改善作用。這些研究結果雖然證明氫水對治療多種疾病和提高運動員的體能有作用,但是,氫氣對健康人生活質量的影響沒有任何報道。

 

一些報告表明,慢性阻塞性肺疾病和宮頸癌患者氧化壓力程度增加與生活品質下降相關,宮頸癌患者治療過程,補充抗氧化劑能有效提高生活質量。Kang等報道,氫水對肝腫瘤放療治療導致的氧化壓力生活質量下降有改善作用。雖然健康人氧化壓力水平和生活質量的關聯尚不清楚,但是老化、工作壓力都能增加身體氧化壓力水平,健康人幾個小時腦力負荷過度都可以導致氧化壓力增加,這表明預防日常工作所引起的氧化壓力積累,不僅對改善生活質量,也對緩解衰老帶來的負面影響都可能有價值。連續飲用氫水能減少氧化壓力的積累,從而有助於生活質量的改善。本研究的目的是探討飲用每天600毫升氫水連續4周對成年人生活質量的影響,研究方法採用問卷調查志願者睡眠、疲勞、情緒、焦慮、生活質量、抑鬱等的情況,並對部分血液指標和自主神經功能和高級認知功能進行測試。

對象與方法

 

年齡20-49歲的31個成人志願者參加了這個雙盲、隨機、安慰劑對照研究和一個雙向交叉設計。排除標準(存在這類情況的人不能參加)包括:慢性病史、慢性藥物或使用補充維生素、輪班工作就業、妊娠、體質量指數1729、食物過敏、吸煙史或過量飲酒史(60/天)。輪班工人被排除在外,因為試驗需要在早餐和晚餐飲水,輪班工人無法按照一致要求飲水,而且夜班或換檔對心理和身體會產生很大影響。參與者被要求避免飲酒,因為過量飲酒對身體狀況可能會產生顯著影響。所有試驗均符合國家法律規定進行,符合世界醫學協會人體醫學研究倫理原則的代碼(赫爾辛基宣言),並進行了UMIN臨床試驗註冊(第umin000022382)。研究方案由大阪城市大學健康科學創新中心倫理委員會批准,所有參與者均提供參與研究的書面知情同意書。

 

研究設計

 

本試驗為雙盲、安慰劑對照研究和一個雙向交叉設計。具體說是,將受試者分為兩組,其中一組先喝氫水4周,過一段時間,再喝普通水4周;另一組先喝普通水,然後過一段時間喝氫水,將喝氫水和普通水之間的數據進行對比。26志願者,13名女性,13名男性,平均年齡為34.4±9.9歲,26人被隨機分配兩組,志願者連續4周每天口服富氫水600毫升或等量普通安慰劑水。仔細的人可能會發現,剛開始試驗的時候有31日,後來的結果成了26人,其中5個因為各種原因被剔除。

 

飲用的氫水濃度為0.81.2 ppm,鋁袋包裝,是日本美樂迪安股份公司的產品,安慰劑用水來自同一來源的礦泉水,除了不含有氫氣,其他成分完全一致。

 

使用安慰劑水,就是為了避免安慰劑效應,這是醫學研究的必需規範,因為人容易被暗示,而暗示可以產生一定效應,這一效應一般人都說是心理作用,就是安慰劑效應。安慰劑效應經常被人作為攻擊某種物質有效的一種武器,要反對某種方法沒有效果就說是安慰劑效應。其實安慰劑效應沒有那麼簡單,有時候因為存在安慰劑效應把真正的藥物作用給掩蓋也是有的,而且還有反安慰劑效應,就是有人如果對一種方法表示懷疑,可能會把有效的藥物效果給掩蓋。所以不要把安慰劑效應當成反對武器,應該利用這種效應,在研究中通過安慰劑對照,排除這種效應,獲得最終確定性結論。正是因為存在安慰劑效應,將許多本來有效的手段給掩蓋,或將顯著效果變的不那麼顯著。

 

試驗過程中,受試者飲用氫水或安慰劑水每天兩次,要求是早餐和晚餐期間,在5分鐘內將300毫升水喝完,這是為避免氫氣從水中釋放,導致劑量降低出現誤差。每天記錄飲水量,飲水必須持續4周。

 

參考曾經有使用氫氣濃度低於1.3 ppm的人體研究報道,本研究使用0.8-1.2ppm氫水濃度進行研究,統一飲用量600毫升沒有考慮體重因素也是基於過去研究報道。4周觀察時間也是參考過去一般2-8周的報道;中間4周休息時間(wash out),也是參考過去的研究報道。在進行研究中,選擇劑量和給藥方法都是有依據的,有的是根據預試驗摸索的劑量,有的是根據過去研究論文中使用的劑量,總之怎麼使用都需要有道理。

 

試驗過程中,受試者被告之21點吃完晚餐,需要盡快上床休息,直到次日上午9點都避免任何食品,以免影響血液樣本中炎症和氧化壓力等測量參數。次日9:00點,受試者完成問卷,確認有沒有飲酒並在21點前吃完晚飯,夜間禁食。09:30進行自主神經功能測量。09:45進行認知功能進行測試。在10:00收集血液樣本。每個受試者分別在飲水2周和4周共進行4次上述測量。每次測試日前24小時,受試者都被告知避免飲酒和劇烈的體育活動,保存正常飲食、飲水和睡眠習慣。試驗期間每天白天活動量用計步器進行測量,每天記錄飲水量和試驗用水量,也記錄自我感覺如是否有疼痛、乏力、其他不適和睡眠時間等。

 

問卷調查

 

問卷又稱調查表,是社會調查研究中收集資料的一種工具,其形式是以問題的形式系統的記載調查內容的一種印件,其實質是為了收集人們對於某個特定問題的態度行為特徵價值觀觀點或信念等信息而設計的一系列問題。本研究中採用了問卷方法研究受試者在疲勞、情緒、抑鬱、睡眠等方面的資料,分析飲用氫水對這些情況的影響。

 

該研究使用Chalder Fatigue Scale大阪城市大學醫院改良版測量疲勞嚴重程度。這種量表是一類研究方法,就是用比較簡單的選擇題讓受試者進行回答,根據答題得分對受試者疲勞程度進行計量。採用K6 scale分析受試者情緒和焦慮狀況。採用流行病學研究中心抑鬱量表測定抑鬱症的症狀。採用匹茲堡睡眠質量指數和埃普沃思嗜睡量表計算受試者一般睡眠和白天嗜睡情況。

 

這些日本版本問卷的可靠性和有效性已被證實。

 

自主神經功能試驗

 

心身疾病的發病,一般說來,與自主神經的不穩定性有關,且

大多數心身疾病均發生在自主神經支配的器官上。因此.自主神經功能檢查對心身疾病的診斷有一定的幫助。常用的檢查方法有眼心反射、臥立試驗、竪毛反射、組胺試驗、體位變換試驗等。

 

本研究只採用心率變異性判斷自主神經功能,要用心電圖和心率測量,通過軟件利用最大熵方法分析獲得受試者心率變異性,具體是在0.040.15赫茲的頻率範圍內低頻成分(LF)和在0.150.4 Hz頻率範圍高頻成分(HF)。高頻成分主要決定於迷走神經興奮性,而低頻成分則反映了交感神經活動和迷走神經的聯合作用結果。一些綜述論文提到,低頻成分也在一些研究論文中作為交感神經活性的標誌。自主神經功能測試用時4分鐘,包括預檢測1分鐘和正式測量3分鐘。根據過去研究報道,這些測試方法可靠性均得到確定。

 

認知功能測試

 

以前的研究已經表明,採用任務切換的方法能有效評價疲勞條件下認知功能。本研究採用改良先進連線試驗任務作為任務切換認知功能評價。利用圈數從11312個不同的字母日本假名在屏幕上的任意位置顯示,要求被試使用電腦鼠標交替觸摸數字和假名。當參與者接觸目標圈,圖像會停留下來,但顏色從黑色變為黃色。參與者被指示為正確迅速地執行任務,連續執任務5分鐘。根據三個指標來判讀受試者認知功能,分別是正確次數、錯誤次數和總任務次數。測試時讓受試者先練習1分鐘,然後進行正式測試5分鐘。根據過去研究報道,這一測試方法能準確反映受試者認知功能。

 

血液分析

 

每次在測試日採集肱靜脈血樣,採樣量為13 mL血液,整個試驗受試者都被採集4次血液。血液經1470g離心5分鐘。高敏C反應蛋白在4°C條件下用BNII分析儀評估血清樣品免疫濁度。血清樣品中氧化活性用活性氧代謝產物分析測試。血清抗氧化電位用JCABM1650自動測試儀測定抗氧化活性。活性氧代謝產物濃度用卡爾單位表示,1 U相當於0.8毫克過氧化氫/升。氧化壓力指數(OSI)用以下公式計算OSI = C×(d-roms / BAP),其中C是一個標準化的系數,OSI健康個體C = 8.85。所有血清樣本測試前存放在-80°C。高敏C反應蛋白在東京LSI公司完成,血清總氧化產物和抗氧化能力在山口大學醫學研究院進行。

 

 

日間活動和日記

 

日間活動,主要代表熱量消耗和身體活動量情況,本研究使用主動式計步器記錄(歐姆龍hja-350it)。

 

保持4周的每天日記,包括剛剛醒來後和睡前疲勞視覺模擬評分,評分0代表「不疲勞」,100代表「筋疲力盡」;睡眠時間、身體狀況和特殊事件(不同平常的情況)。研究人員在每周都仔細檢查受試者日記。

 

統計分析

 

首先對數據用Kolmogorov Smirnov進行分部特徵分析,將數據根據種類用平均±標準偏差或中位數和四分位數間距進行記錄。根據數據類型進行統計學差異分析。以p<0.05作為差異顯著性標準。統計分析採用SPSS統計軟件包20版本。

 

研究結果

 

結果發現氫水飲用後,受試者許多指標都得到顯著改善,尤其關鍵的是焦慮指數下降明顯,低頻心率變異下降說明患者自主神經功能也有改善。其他指標和血液中指標沒有明顯改變說明需要對氫氣效應的本質進行深入研究的必要性。

 

一般結果。主要是根據情況排除了5名受試者。

 

二、問卷調查結果。

問卷調查結果的基礎線,兩組之間沒有差別,但是飲用氫水後發現PSQI K6CFS出現顯著下降, K6評分後/前變化率明顯低於對照安慰劑水的情況。其他問卷調查數據沒有出現變化。這個結果說明,氫水飲用可以緩解健康人疲勞感,減少焦慮,讓人身體更健康。

 

自主神經功能。

 

LFHFLF/HF比值與基線(預)之間無顯著差異,氫水飲用後HFLF / HF比值沒有改變,但LF顯著下降,後/前變化率也顯著降低。這個結果說明,氫水飲用能改善健康人自主神經功能

 

認知功能

 

雖然正確率和錯誤率都沒有發現區別,但氫水飲用後受試者反應速度提高,具體表現就是操作次數明顯增加。

 

血液樣本分析。

 

本研究沒有發現氫水對各種血液指標的明顯影響

日間活動和日記。

 

4周給氫水和安慰水之間並沒有顯著差異,熱量和體力活動量沒有差異,起床和睡前視覺模擬疲勞評分、睡眠時間、身體狀況和特殊事件次數都沒有明顯差異。

 

討論

 

目前的研究結果表明,健康人連續4周飲用氫水可以改善生活質量,主要表現在情緒改善減少焦慮,也能減少交感神經系統的活動。

 

2007年,太田成男教授課題組最早報道氫氣在中樞神經系統疾病的治療作用。作用主要是氫氣作用一種抗氧化劑,能選擇性中和羥基自由基,減少中樞神經損傷。過去研究提出,氫水也具有神經保護效應,具有抗衰老、緩解老年大鼠牙周病氧化損傷等作用。氫氣生理鹽水注射能緩解大鼠阿爾茨海默病,預防神經炎症和氧化壓力,提高記憶功能。但關於氫水和生活質量關係的研究,過去只有一項研究發現連續6周飲用氫水能改善肝腫瘤患者放射治療造成的生活質量下降,但並沒有關於氫水對健康人生活質量方面的研究報道,其他對健康人效應的研究也十分少見。

 

有一種觀點認為,氫氣只對疾病有治療作用,但對健康人沒有作用,這是基於和疾病治療效果比較,氫氣對健康人的一般生理指標沒有明顯影響,但這個推測本身可能存在邏輯問題。理論上,如果氫氣能治療疾病,對健康人也應該有作用,儘管這種作用比較難以觀察和測定。例如本研究中採用心率變異率,發現飲用氫水能影響這一指標,其關鍵原因是這種指標的敏感度足夠高。但血液酸鹼度、心率、血壓和體溫等更重要,但也更穩定的指標,氫氣可能就不會產生明顯影響。另外,氫氣的作用可能是穩態調節劑,是促進穩態的建立,只有對那些穩態出現了問題的情況,氫氣的作用才能顯現出來。

 

論文作者認為,雖然過去研究報道氫水對健康人作用未知,但是所謂健康人並不都是真正健康的人,工作壓力過大和短時間精神身體過度勞累都可以引起急性疲勞,並能增加氧化壓力。過去研究發現,補充抗氧化劑能有效緩解健康志願者的身體疲勞。目前研究新發現氫水不僅影響身體狀況,也對精神情緒、焦慮和自主神經功能有作用。氫氣的優點之一是穿過血腦屏障的巨大能力,這給氫氣減少大腦內氧化壓力提供了重要潛力。研究發現,老鼠大腦氧化壓力的標記丙二醛水平是血液中的4.8倍,這說明氫氣或氫水對減少日常生活中大腦氧化壓力有很大可能,可能是氫氣維護中樞神經系統功能,避免生命質量下降的原因。

 

本研究發現,氫水能優化情緒,減少焦慮水平,負面情緒也存在氧化壓力的因素。社交恐懼症、抑鬱症、焦慮和其他神經精神障礙都已經被證明與氧化壓力增加有關。神經炎症與疲勞、焦慮、睡眠障礙有關,對在年長老鼠氫水可抑制類似抑鬱的症狀。這些發現表明,氫水飲用4周有效控制負面情緒可能是通過減少中樞神經系統氧化壓力和炎症實現的。越來越多的證據表明,氧化壓力和炎症是多種神經精神疾病的病理基礎,氫氣能減少氧化壓力和炎症,因此氫氣有可能對緩解多種神經精神疾病症狀。先前研究顯示,大腦氧化壓力能導致認知和神經精神障礙(精神分裂症)目前的研究中,氫水飲用可以促進認知功能,表明減少大腦組織氧化壓力可能是氫氣提高動物認知功能的原因。

 

氧化壓力可以提高交感神經活躍度,促進氧化壓力,提高促炎細胞因子的生產。自主神經功能與氧化壓力和炎症密切相關。本研究發現,氫水飲用後成年志願者在靜息狀態交感神經系統活動下降,這說明是氫氣減少了氧化壓力在自主神經功能中的具體表現。但是本研究缺乏氧化壓力標記物降低的證據,這可能是氫氣攝取量不足造成,也有可能是受試者本身氧化壓力水平比較低,對氫氣的效果不敏感造成。實際上,代表氧化壓力水平的血清d-ROMs卡爾單位在第一次測量結果就屬於正常範圍(307.1±49.4)。日常工作負載和壓力也會造成氧化壓力水平的波動。Garcia-Nino等研究發現,動物大腦內丙二醛水平比血清中濃度高4.8倍,說明大腦內氧化壓力更嚴重。氫水飲用4周可能可減少大腦內氧化壓力,並因此改善焦慮和自主神經功能。根據過去研究數據,本研究交感神經活動也處於正常範圍,但日常工作負載波動和壓力也會導致交感神經活動出現波動,氫水飲用能降低交感神經活性的結果也符合氫氣具有抑制交感神經活動過度的效果。

 

本研究的不足是在於受試者數量太少,但研究結果可以繼續推廣,開展更大規模的研究對獲得確定結論是至關重要的。雖然只研究了氫水對中樞神經系統的影響,但並沒有直接評估大腦的炎症和氧化的數據。該課題組目前正在使用正電子發射斷層掃描和磁共振成像等先進神經影像學研究技術,進一步探索氫水飲用對中樞神經系統的影響,以解釋氫水飲用改善生活質量的原因。

 

總之4周氫水飲用能對健康成年志願者情緒、焦慮和自主神經功能有改善作用。研究表明氫水是提高生活質量,維持健康的一個有效方法。進一步研究中,研究小組將努力確定氫水對抗壓力緩解疲勞的原因。

 

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